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原代細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)介紹

日期:2025-04-16 16:27
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摘要: 原代細(xì)胞培養(yǎng)就像是從種子開始種一棵樹,要把動(dòng)物組織從機(jī)體里取出來,經(jīng)過各種處理,讓細(xì)胞在培養(yǎng)基里生存、生長(zhǎng)和繁殖。 準(zhǔn)備材料和儀器: 儀器:培養(yǎng)箱(37℃)、培養(yǎng)瓶、吸管、離心機(jī)…… 材料:動(dòng)物組織塊 試劑:1640培養(yǎng)基(含20%小牛血清)、0.25%胰酶、Hank's液等。 處理組織: 把組織塊放在燒杯里,用Hank's液洗2-3次,去掉血污。如果懷疑污染,就用青鏈霉素泡30-60分鐘。 剪切和消化: 用眼科剪把組織切成2-3毫...

原代細(xì)胞培養(yǎng)就像是從種子開始種一棵樹,要把動(dòng)物組織從機(jī)體里取出來,經(jīng)過各種處理,讓細(xì)胞在培養(yǎng)基里生存、生長(zhǎng)和繁殖。


準(zhǔn)備材料和儀器:

儀器:培養(yǎng)箱(37℃)、培養(yǎng)瓶、吸管、離心機(jī)……

材料:動(dòng)物組織塊

試劑:1640培養(yǎng)基(含20%小牛血清)、0.25%胰酶、Hank's液等。

處理組織:

把組織塊放在燒杯里,用Hank's液洗2-3次,去掉血污。如果懷疑污染,就用青鏈霉素泡30-60分鐘。

剪切和消化:

用眼科剪把組織切成2-3毫米的小塊,然后加入胰蛋白酶液,放到37℃的溫箱里消化。每隔20分鐘搖一搖,直到細(xì)胞分散成團(tuán)或單個(gè)細(xì)胞。??

分離和計(jì)數(shù):

用篩子過濾掉沒消化開的組織塊,離心后吸出上清,加入培養(yǎng)液。用計(jì)數(shù)板數(shù)一數(shù)細(xì)胞密度,調(diào)整好后分裝到培養(yǎng)瓶里。

培養(yǎng):

把培養(yǎng)瓶放到36.5℃的溫箱里,靜待細(xì)胞生長(zhǎng)。如果用CO?溫箱,記得用紗布或螺旋帽堵住瓶口。


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